輸血醫學
作  者╱
朱正中、朱芳業、李俊億、余榮熾、何國維、林冠州、林惠淑、林尊湄、林媽利、洪英聖、孫建峰、涂玉青、張小琳、張志昇、張建國、張鳳娟、陳定平、陳淑惠、陳瀅如、程仁偉、黃仰仰、楊孟樺、楊國梁、萬祥麟、葉庭吉、詹詠絮、劉大智、黎蕾、闕宗熙、羅仕錡
出版社別╱
五南
出版日期╱
2024/03/19   (6版 2刷)
  
即日起五南舊官網僅提供書籍查詢,如欲購書,請至五南新官網 https://www.wunan.com.tw/
I  S  B  N ╱
978-626-366-362-6
書  號╱
5J83
頁  數╱
488
開  數╱
16K
定  價╱
850
教學資源╱
投影片((外加))



成功的醫療維繫在安全的輸血,而安全的輸血有賴於建全的醫院血庫作業、正確的醫療用血,以及健全的捐血系統,輸血醫學的發展促成了現代醫學的進步。
本書集合了許多優秀的輸血工作人員及專家學者撰寫而成,內容涵蓋重要的輸血議題:各種血型及相關的抗體、本土血型的基因研究、醫院的血庫檢驗作業、小兒的輸血、輸血反應、血小板的輸血、捐血機構的作業、輸血醫學的品質管理、親子鑑定、HLA、血液幹細胞移植與血庫作業、輸血後感染,以及生物枝術在血庫的應用。
本書適用於大專院校生物相關科系、醫學系及醫技系的教學、醫院血庫工作人員的參考書,及醫院醫師輸血時的參考。

本書特點
1. 集合所有和輸血相關的資訊,既實際,也有理論。
2. 大部分為臺灣本土資料。
3. 附錄有豐富的臺灣本土資料,包含:
●馬偕紀念醫院的臺灣各族群之血型、HLA、血小板特異抗原、白血球(顆粒球)特異抗原HNA-1頻率。
●台灣血液基金會捐血人的各種血型頻率及血型抗體頻率。
●慈濟骨髓幹細胞中心的捐髓者HLA基因頻率。

朱正中
學歷
國立臺灣大學生化科學所博士
經歷
馬偕紀念醫院醫研部免疫基因組研究員
馬偕紀念醫院醫研部技術主任
中央研究院生物化學所博士後研究員

朱芳業
現職
亞東紀念醫院臨床病理科主任
亞東紀念醫院品質管理中心主任
亞東紀念醫院家庭醫學科主治醫師
學歷
中國醫藥大學醫學系學士
經歷
國家輸血實驗室研究進修
省立桃園醫院實驗診斷科主治醫師
省立桃園醫院實驗診斷科副主任
行政院衛生署桃園醫院臨床病理科/檢驗科主任
美國哈佛大學甘迺迪政府學院菁英領導班進修

何國維
現職
台灣血液基金會台南捐血中心醫務組醫師
學歷
國立成功大學醫學系學士
經歷
國立成功大學醫學院附設醫院放射線診斷部醫師

余榮熾
現職
國立臺灣大學生命科學院生化科學研究所教授
學歷
國立臺灣大學生化科學研究所博士
國立臺灣大學生化科學研究所碩士
國立臺灣大學動物學系學士
經歷
馬偕紀念醫院醫學研究部輸血醫學研究室研究員
國立臺灣大學總務處副總務長
國立臺灣大學生化科學研究所所長
藥華醫藥股份有限公司(國發基金官股代表)董事

李俊億
現職
國立臺灣大學法醫學研究所教授

林冠州
現職
台灣血液基金會台中捐血中心主任
學歷
國立中山大學企管碩士
中國醫藥大學醫技系理學士
經歷
台北捐血中心資訊、檢驗、採血課課長、成分課副課長、站長
高雄捐血中心技術、業務組組長、檢驗課課長
台灣血液基金會業務處長
台灣血液基金會新竹捐血中心主任

林尊湄
現職
國立成功大學醫事檢驗生物技術學系兼任副教授
台灣輸血學會監事
學歷
國立臺灣大學醫事技術學系學士
國立成功大學基礎醫學研究所博士
經歷
義守大學醫學檢驗技術系教授、主任
義大醫院醫學檢驗部部長
義大醫院醫學研究部研究員、副部長
國立成功大學醫事檢驗生物技術學系講師、副教授
台灣輸血學會理事

林惠淑
學歷
國立臺灣大學醫事技術學系學士
美國AABB 血庫專門領域醫事檢驗師SBB課程結業
美國臨床病理學會血庫專門領域醫事檢驗師SBB(ASCP)
經歷
臺大醫院輸血醫學科組長
台灣輸血學會理事
台灣輸血學會血庫工作人員在職訓練班講師

林媽利
現職
馬偕紀念醫院名譽顧問醫師
學歷
美國病理學院(CAP)及臺灣臨床病理、解剖病理專科醫師
國立臺灣大學病理研究所碩士
高雄醫學院醫學系學士
經歷
國立臺灣大學醫學院病理科助教、講師、副教授
馬偕紀念醫院檢驗科主任、醫學研究部輸血醫學研究中心主任
台灣輸血學會理事長、榮譽理事長
國際輸血學會理事、國際輸血學會西太平洋區1999年大會會長及2011年大會榮譽會長

洪英聖
現職
台灣血液基金會業務處長
學歷
國立臺灣大學流行病學研究所
國立臺灣大學醫事技術學系學士
經歷
台北捐血中心業務組長、技術組長、採血課長、供應課長、成分課長、檢驗課長

孫建峰
現職
未來醫檢臨床病理科專科診所院長
學歷
國立臺灣大學醫學院醫學系畢業
美國病理學院解剖病理暨臨床病理專科醫師
美國病理學院輸血醫學次專科醫師
經歷
美國喬治亞史都華堡美國陸軍醫院病理科主治醫師及主任
林口長庚醫院臨床病理科主任
長庚大學醫學院病理科教授
台灣輸血學會理事長
台灣臨床病理暨檢驗醫學會理事長
台灣病理學會理事長

涂玉青
現職
國立陽明交通大學醫學生物技術暨檢驗學系暨研究所教授
學歷
國立臺灣大學生化科學所博士
國立陽明大學醫學生物技術研究所碩士
國立陽明大學醫學生物技術檢驗學系學士
經歷
馬偕紀念醫院醫學研究科研究助理
國立陽明大學醫學生物技術暨檢驗學系助理教授
國立陽明交通大學醫學生物技術暨檢驗學系副教授

張小琳
現職
馬偕紀念醫院血庫資深醫檢師
學歷
元培醫事科技大學醫事技術科
經歷
臺大醫院血庫研究助理

張志昇
現職
台灣輸血學會秘書長
學歷
臺北醫學大學生物醫學資訊研究所碩士
中國醫藥大學醫事技術學系學士
經歷
臺大醫院輸血醫學科組長
台灣輸血學會理事,監事,副秘書長
台灣組織相容免疫基因學會理事,監事
台灣醫事檢驗學會血庫醫檢學專家
台灣醫事檢驗學會血庫專門領域醫事檢驗師

張建國
現職
中國醫藥大學精準醫學中心副院長
學歷
高雄醫學院醫學系學士
經歷
臺灣臨床病理內科及血液科專科醫師
高雄醫學大學教授及附設醫院副院長
中國醫藥大學教授及附設醫院副院長
國科會傑出特約研究員

張鳳娟
現職
台北馬偕紀念醫院血庫資深醫檢師
學歷
中台科技大學醫事技術科
經歷
台北馬偕紀念醫院檢驗科血庫組組長
台灣輸血學會理事
台灣輸血學會血庫工作人員在職訓練班講師

陳定平
現職
長庚大學醫技系兼任教授
林口長庚紀念醫院檢驗醫學部特殊醫檢師
台灣輸血學會理事
台灣組織免疫學會理事
學歷
長庚大學醫學院生物醫學研究所博士
國立陽明大學公共衛生學研究所碩士
國立陽明大學醫事技術學系學士
經歷
長庚大學醫技系兼任副教授
長庚大學醫技系兼任助理教授
長庚大學醫技系兼任講師
林口長庚紀念醫院檢驗醫學部教學醫檢師
林口長庚紀念醫院檢驗醫學部專業醫檢師

陳淑惠
現職
雙和醫院小兒科
臺北醫學大學醫學系小兒學科副教授
學歷
高雄醫學大學醫學系學士
經歷
馬偕紀念醫院小兒科主治醫師
美國聖猶達兒童研究醫院骨髓移植臨床研究員
美國波士頓兒童醫院及Dana-Farber Cancer Institute 造血幹細胞移植臨床研究員
花蓮慈濟醫院小兒科主治醫師
花蓮慈濟醫院骨髓幹細胞中心暨骨髓資料庫醫務主任
中華民國血液及骨髓移植學會副秘書長

陳瀅如
現職
臺北榮民總醫院內科部輸血醫學科組長
台灣輸血學會理事
學歷
國立陽明大學醫事技術學系學士
經歷
台灣輸血學會監事
台灣輸血學會血庫工作人員在職訓練班講師
台灣醫事檢驗學會血庫專門領域醫檢師
國立陽明大學醫學生物技術暨檢驗學系兼任講師級專業技術教師

程仁偉
現職
台灣血液基金會研究處處長
學歷
國立臺灣大學醫學院生化學博士
經歷
台灣血液基金會研究處處長

黃仰仰
現職
瑞安國際股份有限公司顧問
學歷
國立臺灣大學醫技系學士
經歷
臺北國泰綜合醫院檢驗科主任
新竹國泰綜合醫院檢驗科主任
台灣醫事檢驗學會常務理事
台灣輸血學會理事、監事
美國阿拉巴馬州立大學(UAB)醫學中心血庫進修

楊孟樺
現職
台灣血液基金會研究處技正
學歷
國立陽明交通大學臨床醫學研究所博士
國立陽明交通大學遺傳學研究所碩士
臺北醫學院醫事技術學系學士
經歷
台北捐血中心技術組技正

楊國梁
現職
佛教慈濟醫療財團法人花蓮慈濟醫院骨髓幹細胞中心主任
學歷
西北奧克拉荷馬州立大學學士
西北奧克拉荷馬州立大學碩士
渥太華大學碩士
加拿大實驗室技術學會研究員
經歷
佛教慈濟醫療財團法人花蓮慈濟醫院骨髓幹細胞中心主任
佛教慈濟醫療財團法人花蓮慈濟醫院免疫遺傳學中心骨髓幹細胞中心主任
佛教慈濟醫療財團法人花蓮慈濟醫院臍帶血庫幹細胞中心主任
佛教慈濟大學副教授
加拿大紅十字國家實驗室科學家

萬祥麟
現職
佛教慈濟醫療財團法人台北慈濟醫院檢驗科主任,血液腫瘤科醫師
學歷
阿拉巴馬大學伯明罕分校(UAB), MSCLS
國防醫學院醫學士
經歷
三軍總醫院臨床病理科、內科、血液腫瘤科醫師

葉庭吉
現職
馬偕兒童醫院兒童血液腫瘤科主任
馬偕醫學院醫學系副教授
學歷
中國醫藥大學醫學系學士
經歷
美國聖裘德兒童研究醫院 骨髓移植與細胞治療部進修
兒童腦瘤聯盟理事
馬偕醫學院醫學系助理教授

詹詠絮
現職
馬偕紀念醫院檢驗科血庫組組長
學歷
中臺科技大學醫事技術科
經歷
國立臺灣大學公共衛生研究所研究助理

劉大智
現職
彰濱秀傳紀念醫院血液腫瘤科主任暨彰化院區癌症醫院副院長
國立中山大學學士後醫學系合聘教授
學歷
高雄醫學大學醫學士
高雄醫學大學醫學研究所博士
經歷
高雄醫學大學醫學院講師、副教授、教授
高雄醫學大學附設醫院血液腫瘤科主任
高雄醫學大學附設醫院血庫主任
美國哈佛大學醫學院Dana-Farber Cancer Institute 研究員
台灣輸血學會理事

黎蕾
現職
台灣血液基金會公關處長
中華捐血運動協會宣傳組長
台灣輸血學會常務理事
學歷
國立陽明大學生化暨分子生物研究所分子醫學組博士
經歷
台北捐血中心品保組長,技術組長,供應課長,檢驗課長
長庚大學醫學生物技術暨檢驗學系講師

闕宗熙
現職
林口長庚紀念醫院檢驗醫學部主任
長庚大學醫學系兼任教授
台灣輸血學會理事長
學歷
國防醫學院醫學士
美國科羅拉多州立大學微生物學博士
經歷
國防醫學院預防醫學研究所研究員、組長
美國疾病管制中心研究員
國防醫學院醫學科學研究所副教授、教授
三軍總醫院健康管理中心主任醫師
三軍總醫院臨床病理科主任醫師、血庫中心主任

羅仕錡
現職
臺大醫院檢驗醫學部主治醫師
國立臺灣大學醫學院檢驗醫學科助理教授
台灣輸血學會理事
學歷
國立臺灣大學醫學院醫學士
國立臺灣大學醫學院藥理學科博士
經歷
臺大醫院輸血醫學科主任

目錄
第1章 紅血球的抗原抗體反應
1.1 血型抗原
1.2 血型抗體
1.3 紅血球的抗原抗體反應
1.4 增強紅血球凝集反應的方法
參考文獻
第2章 ABO、H、Lewis血型系統
2.1 ABO血型
2.2 ABO血型抗體
2.3 ABH和Lewis醣抗原結構
2.4 ABO血型的分子遺傳學
2.5 ABO亞血型
2.6 後天ABO血型的改變
2.7 H血型系統
2.8 臺灣ABO亞血型及H缺乏血型的頻率
2.9 Lewis血型系統
參考文獻
第3章 Rh血型系統
3.1 RH血型系統命名
3.2 Rh血型抗原D, C/c, E/e抗原頻率與半套體(haplotypes)
3.3 Rh基因
3.4 RhD/RhCE蛋白與Rh血型抗原D, C/c與E/e
3.5 D抗原變異表現型(D variants)與Rh陰性
3.6 D--及相關血型
3.7 臺灣病人輸血前做常規RhD篩檢之評估
參考文獻
第4章 MNS血型系統
4.1 簡述
4.2 抗原結構
4.3 抗體
4.4 MNS系統的稀有抗原及hybrid glycophorins
4.5 臺灣的GP.Mur(Mi.Ⅲ)血型
4.6 臺灣的Anti-‘Mia’
4.7 Mia抗原的研究
4.8 GP.Mur血型的生理相關研究
4.9 單株抗體的製作
4.10 Mia抗原及hybrid glycophorins在各國捐血人的頻率
4.11 ‘N’抗原與GP.Mur血型
參考文獻
第5章 P1PK血型系統與相關抗原/I血型系統與i抗原
5.1 P1PK血型系統與相關血型系統及抗原
5.2 I血型系統、i抗原與冷凝集
參考文獻
第6章 其他血型系統(Kidd、Duffy、Kell、Diego及Lutheran)
6.1 Kidd血型系統
6.2 Duffy血型系統
6.3 Kell血型系統
6.4 Diego血型系統
6.5 Lutheran血型系統
參考文獻
第7章 直接抗球蛋白檢驗陽性與免疫性溶血
7.1 自體免疫溶血性貧血(AIHA)
7.2 藥物誘導的免疫溶血性貧血(DIIHA)
參考文獻
第8章 輸血前配合試驗(Compatibility Testing)
8.1 病人血液檢體
8.2 配合試驗
8.3 血清學測定
8.4 交叉試驗及解釋
8.5 臺灣的紅血球異體抗體(不規則抗體)
參考文獻
第9章 新生兒及兒童輸血
9.1 紅血球輸血
9.2 新生兒溶血症
9.3 新生兒血小板缺乏症
參考文獻
第10章 人類白血球抗原系統
10.1 HLA system簡介
10.2 HLA抗原分布、生化特性及立體結構
10.3 HLA生理功能
10.4 HLA遺傳學
10.5 HLA分型及抗體檢測
10.6 HLA命名系統
10.7 臺灣族群HLA基因頻率及單倍型頻率
10.8 HLA與輸血相關事件
10.9 HLA檢驗與移植
10.10 HLA分型在其他臨床應用
參考文獻
第11章 血小板與中性球抗原系統
11.1 血小板抗原系統
11.2 非HPA抗原系統之其他抗原
11.3 血小板抗體的臨床意義
11.4 血小板抗體檢測方法
11.5 人類中性球抗原系統(Human neutrophil system)
11.6 中性球抗體之臨床意義
11.7 中性球抗體檢測方法
參考文獻
第12章 輸血反應
12.1 溶血性輸血反應(Hemolytic Transfusion Reactions)
12.2 非溶血性輸血反應
參考文獻
第13章 輸血傳播感染症
13.1 實驗室篩查
13.2 殘餘傳播風險
13.3 特定病原之篩查
13.4 病原滅活技術(PI)
參考文獻
第14章 親子鑑定
14.1 前言
14.2 鑑定原理
14.3 遺傳標記
14.4 鑑定方法
14.5 親子指數計算
14.6 親緣關係研判
14.7 未來發展
參考文獻
第15章 捐血機構作業
15.1 捐血人資格篩選
15.2 血品製備
15.3 感染性疾病篩檢
15.4 血品供應與調節
參考文獻
第16章 輸血療法
16.1 輸血的目的
16.2 血液成分的使用
16.3 輸血療法的適應症
16.4 大量輸血方案(MTP)
參考文獻
第17章 臺灣造血幹細胞移植及移植病人的血庫輸血作業,細胞治療
17.1 異體幹細胞移植
17.2 自體移植病人的輸血
17.3 移植病人的輸血支持另外必須的步驟
17.4 移植兒童病人的輸血支持
17.5 移植病人輸血資訊的可通性
17.6 捐者淋巴球輸注(DLI)
17.7 細胞治療
參考文獻
第18章 分子生物技術在血庫的應用—以血型為例
18.1 血型的基因檢測
參考文獻
第19章 血庫檢驗方法
19.1 血庫凝集試驗操作要領與價數判讀
19.2 抗球蛋白試驗
19.3 輸血前檢查
19.4 其他血庫檢驗方法
參考文獻
第20章 輸血醫學的品質管理
20.1 捐血機構作業流程的品質管理
20.2 血庫的品質管理系統
20.3 臨床輸血作業的品質管理
參考文獻
附錄A 馬偕紀念醫院輸血醫學相關生物統計資料
附錄B 台灣血液基金會捐血人血型抗原及血型抗體資料
附錄C 慈濟骨髓幹細胞中心自願捐髓者HLA的資料

睡眠醫學臨床實
務與應用
提升自我照顧能

低視力學
營養學實驗
視光學
長照機構營運與
品質管理


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1.1 血型抗原
血液中主要存在著3種血球細胞:紅血球、白血球、血小板。人體所有的細胞表面結構都會表現出抗原,作為細胞特有的標記,輸血時當有與自己不同抗原的血球細胞進入體內時,身體就會發生免疫反應,引發特定的抗體產生。而紅血球(red blood cell, RBC)是血液中含量最多的細胞,主要功能是將氧氣運輸到體內組織並將二氧化碳輸送到肺部;紅血球具有雙凹形狀,細胞膜主要由雙層的脂質所構成,中間內嵌一些蛋白質結構,紅血球表面的蛋白質可以分成3種形式(1)穿膜一次的蛋白質、(2)穿膜多次的蛋白質、(3)多醣磷脂肌醇錨定(glycosylphosphatidylinositol anchor, GPI-anchor)蛋白質;紅血球細胞表面的結構如圖1-1所示。人類血型主要由紅血球表面上是否存在某些標識物決定,在輸血醫學我們依RBC表面抗原的差異分類成各種血型;而構成血型抗原主要是紅血球細胞膜上含各種醣基短鏈的醣脂(glycolipid)和醣蛋白(glycoprotein)及不同結構的蛋白質(protein)(圖1-2)。血型抗原如果與醣基種類有關,則決定血型的基因就是特定醣基轉移之酵素(transferase),可製造具特異性醣分子結構的醣脂和醣蛋白;但血型抗原如果是蛋白質,其基因產物就能直接表現在紅血球的膜蛋白。雖然目前紅血球表面抗原有些是細胞膜內的結構蛋白、轉運蛋白、受器和黏附因子(表1-1),但有些血型抗原的功能目前有些還不清楚;有報告證實當紅血球完全不表現某些血型抗原(null表現型),會影響紅血球細胞膜結構,改變血球型態引起溶血現象;有些紅血球抗原已被證實跟寄生蟲和病原菌的感染有關,不表現這些抗原就可減少被感染的機會,例如在瘧疾流行區會出現一些缺乏瘧原蟲接受器的特殊血型。
1900年卡爾.藍斯泰納(Karl Landsteiner)發現不同個體的血球跟血清交叉混合後,有些會產生血球的凝集現象,進而發現了ABO血型,因此開啟了紅血球血型的研究大門。國際輸血學會(International Society of Blood Transfusion, ISBT)的紅血球血型命名委員會,將紅血球的血型系統歸類為血型系統(blood group systems)、血型集合(blood group collection)、低發生率抗原700系列(發生率低於1%)和高發生率抗原901系列(發生率高於90%)等四大類。當一種血型抗原是由一個基因或多個密切連結的基因組所掌控,則定義為血型系統。如果一個血型抗原只有血清學和生化學發現其相關性,但基因尚未明確,我們就把它稱為血型集合。至2021年10月為止共有43個血型系統,由48個遺傳基因決定共有345種抗原(表1-2)。
1.2 血型抗體
人類免疫系統會經由抗原刺激後產生抗體,而紅血球表面上存有數百種抗原,因此人類在輸血或懷孕後,可能接受帶有不同抗原之外來的紅血球進體內,刺激免疫系統產生對抗紅血球的抗體;因此當需要進行輸血治療前,必須確認輸入血液的主要紅血球抗原與病患相同(主要血型分析),且患者體內並無產生特異的紅血球抗體(抗體篩檢),才能夠進行安全輸血。
人類的血型抗體可以分成(1)自然抗體(natural antibody)是不經過輸血或懷孕等已知的免疫刺激所引起的抗體,如血型抗體anti-A、anti-B等,是因A或B血型抗原的構造和消化道中細菌的構造很接近,所以人類在嬰兒時期血漿就會出現相對應的ABO的血型抗體,因此ABO血型的抗體也稱為規則抗體(regular antibodies)。(2)免疫抗體(immune antibody)是由於異體抗原(alloantigen)刺激免疫系統後產生,可能經由輸血免疫和由胎兒的紅血球免疫(在懷孕時或生產時發生)接受別人的血型抗原(自己的血球並不含有)進入體內後產生,我們稱它為不規則抗體(irregular antibodies)。(3)自體抗體(autoantibody)為對抗自體抗原(autoantigen)的抗體,自己血球可能是經藥物或病毒作用引起表面抗原的改變,而刺激免疫系統所產生。
一般抗體的產生過程可分為原發及繼發兩個階段,原發反應是個體第一次接觸到抗原後,在7∼14天內可以測到低力價的IgM抗體;繼發反應是個體再接觸到同樣抗原時,在一星期內出現高力價的IgG抗體(圖1-3)。抗體就是免疫球蛋白(immunoglobin);可以依據不同的重鍵種類可分成五大類,血清中5種免疫球蛋白之比較列於表1-3,其中含量最多的是IgG,而IgG可以分成4個亞型;IgM由5個分子組成,分子最大主要發生在原發反應。IgG和IgM是血庫中較有意義的抗體,兩者都可引起補體固定,在體內引起紅血球破壞,而且結合血球造成凝集反應。而IgG因為可以通過胎盤,如果
母親與胎兒血型不同可能引起新生兒溶血症。
1.3 紅血球的抗原抗體反應
可以用來偵測紅血球抗原抗體的反應,包括紅血球凝集試驗(hemagglutination)、溶血反應(hemolysis)或紅血球凝集抑制試驗(hemagglutination inhibition)。其中以紅血球凝集試驗是實驗室最常用的檢測方法,血庫可以利用已知的抗體來偵測血球抗原,或以已知血型的血球細胞測定血清中的抗體。
紅血球的凝集試驗之抗原抗體反應,可以分成兩個階段來進行:第一階段是抗體與紅血球的抗原產生結合附著在紅血球細胞膜上,我們稱之為致敏作用(sensitization),此階段無法用肉眼看到血球凝集。第二階段是紅血球凝集反應,也就說一個抗體可以藉由兩個或多個抗原的決定位置結合在不同的紅血球細胞膜上面的抗原,而造成紅血球跟紅血球聚集在一起,就可以用肉眼觀察到。血型抗體可以依其反應特性分成完全抗體(complete antibody)和不完全抗體(incomplete antibody)兩大類。完全抗體主要為免疫球蛋白IgM,因抗體分子長度大於35 nm,因此很容易和數個紅血球凝結在一起,而且只要在室溫就可以產生明顯的凝集反應。而免疫球蛋白IgG為不完全抗體,因分子長度小於25 nm,往往需要藉由其他的誘導技術才能夠加強其凝集反應(圖1.4)。
紅血球表面因帶有相當多的唾液酸(sialic acid),所以形成負電荷,在血液中RBC會彼此排斥,因此不會凝集一起,在溶液中這些負電荷會吸附溶液中的陽離子圍繞紅血球形成電子雲,紅血球細胞膜表面的陰電荷與外層陽離子之間的電位差,我們稱它為界達電位(zeta potential)(圖1.5),界達電位大小會限制紅血球彼此之間接近的最小距離,將會影響到紅血球抗原抗體作用的第二階段的凝集反應。而會影響到紅血球界達電位的因素,第一個是紅血球細胞膜所表現的負電荷的多寡,第二個是溶液中離子的強度,第三個就是溶液的介電常數。所以在實驗室進行血球凝集反應實驗時,可以藉由減少紅血球的細胞膜的電荷,增加溶液的介電常數或降低溶液的離子強度,造成界達電位下降,以縮短血球間的距離,讓血球凝集反應容易產生,進而提升凝集檢測的敏感性。
紅血球表面的抗原和抗體結合是一種可逆的反應,其中凝集反應是藉由免疫球蛋白將兩個以上的血球拉在一起,主要影響反應的因素為:
1. 抗原特性與濃度:紅血球表面的每一種抗原特性(大小、化學成分與立體結構)和表現的密度都不盡相同,所以和相對引起抗體反應的強度也會不同,不同血型抗原引發抗體的能力如表1-4。大多數的紅血球抗原量與年齡有關,如ABO抗原在出生時比較少,而到了2歲以後才會和成人一樣多;但ABO抗原的密度相當高,每個紅血球約含有1,000,000個抗原,相對RH抗原在每個紅血球大概只有50,000個抗原,所以在體外RH產生的凝集反應強度會比ABO血型弱。有些血型抗原表現呈現基因配對效應(Dosage effect),也就是說基因量與抗原量表現量成正比,因此會影響血球凝集的強度。
2. 抗體種類:IgG抗體分子較小無法直接使紅血球產生凝集反應,需要加上抗球蛋白抗體(Antiglobulin antibody, AHG)作為第二抗體,凝集反應才能夠顯現出來。反之IgM則分子較大可以直接引起血球凝集反應(圖1-4)。
3. 抗原與抗體的比率:血球凝集反應之最適當的抗原抗體比率,通常要根據做實驗的條件來決定,若加入過濃的血球懸浮液會吸收所有的抗體,分散抗體分子數目而妨礙可見的凝集反應;而過淡的血球懸浮液因抗原量太少也會影響凝集反應的效果。美國血庫學會(American Association of Blood Bank, AABB)建議利用試管法鑑定血型和篩檢不規則抗體時,使用3∼5%的血球懸浮液1滴,加上受檢者的血清2滴,就可以達到較佳的抗原與抗體的比率。
4. 反應溫度:抗原抗體之間作用的化學鍵結包括氫鍵(hydrogen bond)、厭水性效應(hydrophobic interaction)、離子鍵(electrostatic interactions)和凡德瓦力(van der Waals forces),這些化學鍵發生時會產生不同的熱力學變化;因此體外血球凝集反應的適當的溫度,可以因作用抗體的不同分成三類,一種是冷型抗體反應在4∼25℃,大多數是屬於IgM抗體;第二種是溫型抗體主要是作用在30∼40℃,主要是屬於IgG抗體;第三種是廣溫型抗體反應,溫度可以從4∼35℃。冷型抗體主要與血球醣基抗原發生反應會產生放熱反應,而溫型抗體主要與蛋白質抗原反應為吸熱反應。但如果將已經產生抗原抗體反應血球再經過56℃加熱後,結合的抗體就會和RBC抗原分開並游離出來,再進行已知抗原鑑定稱為沖出試驗。
5. 酸鹼值:各種免疫球蛋白的pI介於6.0∼9.5,當溶液pH低於pI時,免疫球蛋白就會帶正電荷,適合與帶有負電荷的紅血球反應,所以進行紅血球抗原抗體反應最適當的pH值在6.0∼7.0左右,在此pH值下紅血球表面帶有負電荷,而免疫球蛋白帶有正電荷,有利於兩者產生反應。
6. 離子強度:溶液所含的離子種類與離子強度會影響紅血球抗原與抗體反應的速度。生理食鹽水中含有Na+跟Cl-會成離子雲,可以中和部分紅血球及抗體分子的帶電性,因此阻礙兩者之間的作用發生。若降低介質的離子強度,可以減少血球間的界達電位和加強靜電吸引作用,就可以拉近抗原和抗體的距離,提高凝集反應的敏感度。
7. 物理因素:影響血球的凝集反應的物理因素包括進行反應的溫度和作用時間,離心的時間和速度。因為離心可以增加抗原抗體碰撞的機會,當然也可以提高抗原抗體反應的機會,同時離心也能幫助抗體穿越包圍在紅血球外圍的離子雲的障礙,可以增加抗原抗體反應的速度。紅血球抗原和抗體引起較弱的凝集反應,就需延長孵育時間才能增加其敏感度。例如抗球蛋白試驗(Antihuman globulin test, AHG)需要在37℃培育30∼60分鐘,才可以測得得到臨床上有意義的抗體。